Ο ΡΟΛΟΣ ΤΟΥ PXR ΣΤΟΝ ΟΡΘΟΚΟΛΙΚΟ ΚΑΡΚΙΝΟ ΣΕ ΣΥΝΑΡΤΗΣΗ ΜΕ ΤΗΝ ΑΥΤΟΦΑΓΙΑ

Εισαγωγή:Ο ορθοκολικός καρκίνος (CRC) είναι μια από τις πιο συχνά διαγνωσμένες κακοήθειες παγκοσμίως. Αν και η χημειοθεραπεία αντιπροσωπεύει μια αποτελεσματική θεραπευτική προσέγγιση, η αποτελεσματικότητα της θεραπείας είναι συχνά περιορισμένη λόγω της ανάπτυξης ανθεκτικών καρκινικών κυττάρων. Αρκετές μελέτες συσχετίζουν τον υποδοχέα πρεγνάνης Χ (PXR) με αντοχή στα χημειοθεραπευτικά φάρμακα ρυθμίζοντας το μεταβολισμό και τη μεταφορά. Η αυτοφαγία αντιπροσωπεύει έναν άλλο γνωστό μηχανισμό αντοχής κατά της χημειοθεραπείας. Μέθοδοι: Οι κυτταρικές σειρές mtKRAS CRC, DLD-1, HCT116 και SW480 επωάστηκαν σε 10 μΜ ιρινοτεκάνη και 20 nM siRNA-PXR για 48 ώρες. Επιπλέον, οι ίδιες κυτταρικές σειρές εκτέθηκαν σε 5 mM 3-MA (3-Μεθυλαδενίνη), 10 μΜ HCQ (Υδροξυχλωροκίνη) και 1 μΜ PI-103 για 24 ώρες. Τα επίπεδα των p62, LC3, PARP και PXR ανιχνεύθηκαν με ανοσοαποτύπωμα κατά Western. Ο υποκυτταρικός εντοπισμός του PXR ανιχνεύθηκε με συνεστιακή μικροσκοπία. Τα επίπεδα έκφρασης διαφορετικών γονιδίων ελέγχθηκαν με RT-PCR. Σκοπός: Ο στόχος αυτής της μελέτης είναι να διερευνήσει τον ρόλο της εξαρτώμενης από mtKRAS αυτοφαγίας συναρτήσει του PXR μετά από θεραπεία με ιρινοτεκάνη στον καρκίνο του παχέος εντέρου. Αποτελέσματα: Η ιρινοτεκάνη ενεργοποιεί την αυτοφαγία σε όλες τις κυτταρικές σειρές CRC που χρησιμοποιήθηκαν. Μετά την αποσιώπιση του PXR με siRNA, η ενεργοποίηση της αυτοφαγίας δεν επηρεάζεται και ενεργοποιείται ο αποπτωτικός κυτταρικός θάνατος. Η αναστολή (HCQ) ή η επαγωγή (PI-103) της αυτοφαγίας φάνηκε να μειώνει και να αυξάνει τα επίπεδα πρωτεΐνης PXR, αντίστοιχα. Επιπλέον, η πυρηνική κατανομή PXR αυξήθηκε μετά την αυτοφαγική επαγωγή, η οποία φαίνεται από τη συνεστιακή μικροσκοπία. Μεταβολές των επιπέδων έκφρασης αρκετών γονιδίων, όπως MDR1, CYP3A4 και GADD45B, σημειώθηκαν από τη RT-PCR σε κυτταρικές σειρές mtKRAS CRC μετά από την αποσιώπιση του PXR. Συμπεράσματα: Συλλογικά, αυτά τα αποτελέσματα υποστηρίζουν την υπόθεση ότι η αυτοφαγία δρα ως κυτταροπροστατευτικός μηχανισμός κατά της ιρινοτεκάνης, πιθανώς μέσω της επαγωγής και της υποκυτταρικής μεταφοράς του PXR σε μοντέλα mtKRAS CRC.