Η αποκατάσταση της έκφρασης της πρωτεϊνικής κινάσης CβII σε κύτταρα μελανώματος αναστέλλει τον αυξητικό φαινότυπο των κυττάρων και προστατεύει από απόπτωση

ΕΙΣΑΓΩΓΗ/ΣΚΟΠΟΣ: Η πρωτεϊνική κινάση C (PKC)βΙΙ ρυθμίζει τη μελανινογένεση μέσω φωσφορυλίωσης της τυροσινάσης, ενώ συχνά παρατηρείται απώλεια της έκφρασής της στο μελάνωμα. Στην παρούσα μελέτη επανεκφράσαμε την PKCβII σε κύτταρα μελανώματος και μελετήσαμε το μηχανισμό δράσης της σε κυτταρικό πολλαπλασιασμό και απόπτωση. ΥΛΙΚΑ & ΜΕΘΟΔΟΙ: Μέσω διαμολύνσεων δημιουργήθηκαν μόνιμες σειρές Α375 κυττάρων μελανώματος που εκφράζουν την PKCβII. Ο κυτταρικός πολλαπλασιασμός αξιολογήθηκε με την μέθοδο ΜΤΤ και την μέτρηση του Ki67 αντιγόνου. Ο κυτταρικός κύκλος και η απόπτωση που επάγεται από την UVB ακτινοβολία μελετήθηκαν με κυτταρομετρία ροής. Η έκφραση πρωτεϊνών που εμπλέκονται στις ανωτέρω διεργασίες εξετάστηκαν με Western blot. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Η έκφραση της PKCβII σε κύτταρα μελανώματος Α375 είχε ως αποτέλεσμα βραδύτερους ρυθμούς κυτταρικού πολλαπλασιασμού, χαμηλή έκφραση Ki67, και υψηλότερα ποσοστά κυττάρων στις S και G2/M φάσεις του κυτταρικού κύκλου. Τα Α375PKCβII κύτταρα παρουσίασαν υψηλότερα επίπεδα της G2/M πρωτεΐνης Aurora Α, των Ρ53 και Ρ21, αλλά χαμηλότερα της κυκλίνης Α2. Τα επίπεδα της pMEK1/2 και της pERK1/2 μειώθηκαν στα Α375PKCβII κύτταρα. Η έκφραση της PKCβΙΙ προστάτευσε τα κύτταρα μελανώματος από την UVB-επαγόμενη απόπτωση, όπως αναδείχθηκε από τον μειωμένο πληθυσμό κυττάρων στη subG1, και την χαμηλότερη έκφραση της Ρ53 με διατήρηση της έκφρασης της BCL2. ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ: Η παρούσα μελέτη αναδεικνύει τη σημαντική κατασταλτική δράση της PKCβII στην ανάπτυξη των κυττάρων μελανώματος μέσω του μονοπατιού ΜΕΚ-ΕRΚ με αναστολή του κυτταρικού κύκλου, αλλά και την προστασία των κυττάρων από την UVB-επαγόμενη απόπτωση.